實驗室儀器眾多。有用來做液體分析的液相色譜儀,也有用來做氣體分析的氣相色譜儀,還有什么凝膠色譜儀,離子色譜儀等等。那么這么多的儀器,都離不開一樣東西。那就是色譜柱。色譜柱有很多種,常規(guī)的色譜柱有很多種,每個廠家的叫法都不一樣,但是我們可以把它統(tǒng)一稱呼為色譜柱。今天就為大家講一種常用的Fortis C8 色譜柱。
1、首先要確認您所要分析的樣品流動相的pH范圍是否在您的柱子的pH范圍之內(nèi),以免損壞柱子硅膠;
2、接下來就是用你做樣品的流動相去平衡柱子,如果您的流動相中含有緩沖鹽溶液,在平衡柱子之前務必要先用5%的甲醇(乙腈)/水去過渡10倍柱體積以上,再用帶鹽的流動相去平衡柱子足夠的時間,之后方可進樣分析;
3、無論您分析何種樣品,都會由于各種原因樣品中總有部分雜質(zhì),因此建議您在進樣前在柱子前端加接保護柱以保護您那昂貴的分析柱,或者用0.2um或 0.45um針頭過濾器過濾樣品后方進樣分析!
Fortis C8 色譜柱的清洗:
分兩種情況進行:
1、如果您的樣品分析只用到一般的甲醇,乙腈和水的流動相(包括流動相里面加了點酸),在做完樣品后可直接用65%的乙腈/水或者純甲醇進行清洗10倍柱體積即可保存;
2、如果您的樣品分析用到了含緩沖鹽或者酸或者離子對試劑的流動相,在做完樣品后的清洗必須按照下列2個步驟進行清洗柱子:
a、重要的步驟——用5%的乙腈(甲醇)/水,清洗20倍柱體積溶劑以上,1~2ml/min(根據(jù)時間自由調(diào)節(jié)流速:如果因為時間來不及而清洗不了那么長時間,可以適當加大流速,比如1.5 or 2ml/min;LC/MS柱子應以0.2~0.5ml/min的流速進行),
b、65~90%的乙腈(甲醇)/水或者純甲醇/乙腈,清洗5~10倍柱體積,1~2ml/min。