新的SVEA C18液相色譜柱活化,實(shí)際上是一個(gè)平衡的過(guò)程,活化之前必須查看包裝內(nèi)配套說(shuō)明書,并按說(shuō)明書上方式,與供應(yīng)商核實(shí)SVEA C18液相色譜柱內(nèi)保存溶劑及推薦活化步驟,若無(wú)推薦步驟可參考如下活化步驟:
1.反相柱活化流程:
?、偌状蓟蛞译鏇_洗20倍柱體積;
②若流動(dòng)相含有緩沖鹽,用跟流動(dòng)相中鹽相等比例的超純水和有機(jī)相沖洗過(guò)渡,用量為20倍柱體積,再用含緩沖鹽的流動(dòng)相平衡SVEA C18液相色譜柱,用量為20倍柱體積或以上;
③若流動(dòng)相不含緩沖鹽,用流動(dòng)相平衡SVEA C18液相色譜柱,用量為20倍柱體積或以上;
?、茏罱K到壓力基線平穩(wěn),若不平穩(wěn)可延長(zhǎng)平衡時(shí)間。
2.正相柱活化流程:
?、俦4嫒軇檎嗳軇r(shí):
若使用正相溶劑做流動(dòng)相,可用正相流動(dòng)相沖洗20倍體積。一般先用異丙醇沖洗50倍體積,可用0.2mL/min流速,再用流動(dòng)相(乙腈/水)平衡50倍體積。
?、诒4嫒軇榉聪囿w系時(shí):
若使用反相體系做流動(dòng)相,使用反相溶劑沖洗20倍體積后即可使用。若使用正相體系做流動(dòng)相先用異丙醇沖洗50倍體積,可用0.2mL/min流速,再用正相流動(dòng)相平衡50倍體積。