SVEA Cyano液相色譜柱在使用前，最好進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來(lái)，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照液相色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行，只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。
1.樣品的前處理：
?、僮詈檬褂昧鲃?dòng)相溶解樣品；
?、谑褂糜杼幚碇悠分械膹?qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)；
?、凼褂?.45μm的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)；
2.流動(dòng)相的配制：
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此，要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：
?、倭鲃?dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中；
②流動(dòng)相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)；
?、哿鲃?dòng)相的黏度要盡量小，以便在使用較長(zhǎng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果；同時(shí)，降低柱壓降，延長(zhǎng)液體泵的使用壽命；
?、芰鲃?dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)，如使用UV檢測(cè)器，最好使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制；
⑤流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行；
⑥在流動(dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè)，還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
3. 流速的選擇：
因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的SVEA Cyano液相色譜柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的液相色譜柱，流速一般選擇1mL/min，對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8mL/min為佳。當(dāng)選用最佳流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長(zhǎng)。可采用改變流動(dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間。
4. 流動(dòng)相使用注意事項(xiàng)：
①由于甲醇廉價(jià)，對(duì)于反相柱推薦使用甲醇體系；
?、趯?duì)于正相柱推薦使用沸程為30-60 ℃的石油醚或提純后的己烷作流動(dòng)相，沒(méi)有提純的己烷不得使用。用水最好使用超純水，去離子水及雙蒸水中含有酚類雜質(zhì)，有可能影響分析結(jié)果；
?、酆鲃?dòng)相最好在實(shí)驗(yàn)前配制，尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動(dòng)相不要過(guò)夜。最好加入NaN3，防止細(xì)菌生長(zhǎng)；
④流動(dòng)相要求使用0.45μm濾膜過(guò)濾，除去微粒雜質(zhì)；
⑤使用HPLC級(jí)溶劑配制流動(dòng)相，使用合適的流動(dòng)相可延長(zhǎng)SVEA Cyano液相色譜柱的使用壽命，提高柱性能。
